描述:上海臻科生物科技有限公司專業(yè)研發(fā)氯霉素快速檢測試劑盒。產(chǎn)品具有靈敏度高、特異性強,重復(fù)性好的特點??蓹z測生長因子、炎癥因子等,適用血清、血漿、組織、尿液等多種標(biāo)本類型檢測。為充分滿足了廣大科研學(xué)者的需求我司特別推出定制ELISA試劑盒和專業(yè)免費代測兩大服務(wù),如需了解更多可我司客服專員。
一.氯霉素快速檢測試劑盒原理及用途
氯霉素快速檢測試劑盒采用間接競爭ELISA方法檢測尿樣、組織、飼料等樣本中的氯霉素,試劑盒由預(yù)包被偶聯(lián)抗原的酶標(biāo)板、辣根酶標(biāo)記物、抗體、標(biāo)準(zhǔn)品及其他配套試劑組成。檢測時,加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品溶液,樣本中的氯霉素和酶標(biāo)板上預(yù)包被偶聯(lián)抗原競爭抗氯霉素抗體,加入酶標(biāo)記物后,用TMB底物顯色,樣本吸光度值與其所含氯霉素含量成負相關(guān),與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較即可得出樣本中氯霉素的殘留量。
二.技術(shù)指標(biāo)及組成
試劑盒靈敏度:0.05ppb(ng/ml)
反應(yīng)模式:25℃,30min~15min
酶標(biāo)板、標(biāo)準(zhǔn)品、高標(biāo)準(zhǔn)品、酶標(biāo)記物、抗體工作液、底物液A、底物液B、終止液、濃縮洗滌液、復(fù)溶液
三.【*優(yōu)勢】
1、產(chǎn)品種類齊全、質(zhì)量可靠、*、靈敏度高、效果穩(wěn)定、易保存、操作簡便
2、免費提供產(chǎn)品zui新報價、實驗原理、產(chǎn)品用途及中英文說明書
3、發(fā)貨及時(上海本地客戶有專門人員送貨上門及取標(biāo)本)
4、免費提供ELISA代測服務(wù),臻科擁有自己的實驗室(北京、上海、武漢)和技術(shù)團隊,公司提供*的售前、售中、售后,為您解決實驗過程中遇到的問題。想要了解更多臻科實驗代做服務(wù),請。
四.需要的器材
儀器:酶標(biāo)儀、打印機、均質(zhì)器 、氮氣吹干裝置、振蕩器、離心機、刻度移液管、天平(感量0.01g)
微量移液器:單道20µl-200µl,100µl-1000µl、多道300µl
五.樣本處理前須知:
實驗器具必須潔凈并使用一次性吸頭,以避免污染干擾實驗結(jié)果。
配液:
配液1:0.1M HCl 溶液 取0.86ml濃HCl加去離子水至100ml。
配液2:0.1M NaOH 溶液 稱取0.4g NaOH加去離子水至100ml。
配液3:乙腈-0.1M HCl 溶液 V乙腈:V0.1M HCl =84:16。
配液4:復(fù)溶液
將10×復(fù)溶液用去離子水10倍稀釋,用于樣本的復(fù)溶,復(fù)溶液在4℃環(huán)境可保存一個月。
六.操作流程
將所需試劑從4℃冷藏環(huán)境中取出,置于室溫平衡30min以上, 洗滌液冷藏時可能會有結(jié)晶需恢復(fù)到室溫以充分溶解,每種液體試劑使用前均須搖勻。取出需要數(shù)量的微孔板及框架,將不用的微孔板放入自封袋,保存于2-8℃。
實驗開始前,用去離子水將20×濃縮洗滌液按20倍稀釋成工作洗滌液。
編 號:將樣本和標(biāo)準(zhǔn)品對應(yīng)微孔按序編號,每個樣本和標(biāo)準(zhǔn)品做2孔平行,并記錄標(biāo)準(zhǔn)孔和樣本孔所在的位置。
加樣反應(yīng):加標(biāo)準(zhǔn)品或樣本50µl/孔到各自的微孔中,然后加酶標(biāo)記物50µl/孔,再加入50µl/孔的抗體工作液,用蓋板膜封板,輕輕振蕩5秒混勻,25℃反應(yīng)30分鐘。
洗 滌:小心揭開蓋板膜,將孔內(nèi)液體甩干,用工作洗滌液250µl/孔充分洗滌5次,每次間隔30秒,用吸水紙拍干(拍干后未被清除的氣泡可用干凈的槍頭刺破)。
顯 色:每孔加入底物液A 50µl,再加底物液B 50µl,輕輕振蕩5秒混勻,25℃避光顯色15分鐘。
終 止:每孔加入終止液50µl,輕輕振蕩混勻,終止反應(yīng)。
測吸光值:用酶標(biāo)儀于450nm處測定每孔吸光度值(建議用雙波長450/630nm)。測定應(yīng)在終止反應(yīng)后10分鐘內(nèi)完成。
七. 結(jié)果分析
百分吸光率的計算
標(biāo)準(zhǔn)液或樣本的百分吸光率等于標(biāo)準(zhǔn)液或樣本的百分吸光度值的平均值(雙孔)除以*個標(biāo)準(zhǔn)液(0ppb)的吸光度值,再乘以100%,即
百分吸光度值(%)= | A | ×100% |
A0 |
A—標(biāo)準(zhǔn)溶液或樣本溶液的平均吸光度值
A0—0ppb標(biāo)準(zhǔn)溶液的平均吸光度值
標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制與計算
以標(biāo)準(zhǔn)液百分吸光率為縱坐標(biāo),對應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)液濃度(ppb)的對數(shù)為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)液的半對數(shù)曲線圖。將樣本的百分吸光率代入標(biāo)準(zhǔn)曲線中,從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出樣本所對應(yīng)的濃度,乘以其對應(yīng)的稀釋倍數(shù)即為樣本中待測物的實際濃度。
若利用試劑盒專業(yè)分析軟件進行計算,更便于大量樣本的準(zhǔn)確、快速分析。(索取)
八.注意事項
室溫低于25℃或試劑及樣本沒有回到室溫(25℃)會導(dǎo)致所有標(biāo)準(zhǔn)的OD值偏低。
在洗板過程中如果出現(xiàn)板孔干燥的情況,則會出現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)曲線不成線性,重復(fù)性不好的現(xiàn)象。所以洗板拍干后應(yīng)立即進行下一步操作。
混合要均勻,洗板要*,在ELISA分析中的再現(xiàn)性,很大程度上取決于洗板的*性。
在所有孵育過程中,用蓋板膜封住微孔板,避免光線照射。
不要使用過了有效期的試劑盒,不要交換使用不同批號試劑盒中的試劑。
顯色液若有任何顏色表明變質(zhì),應(yīng)當(dāng)棄之。0標(biāo)準(zhǔn)的吸光度值小于0.5個單位(A450nm< 0.5 )時,表示試劑可能變質(zhì)。
反應(yīng)終止液有腐蝕性,避免接觸皮膚。
九.特別說明
由于不同指標(biāo)檢測的樣本是不同的,處理方式也是不盡相同,如需了解更多,更詳細的技術(shù)參數(shù)可我司客服專員,歡迎廣大社會各界朋友前來咨詢和了解。